上皮細胞とは何ですか?

人体には多くの細胞があり、細胞によって機能が異なります。そのため、細胞について総合的に理解する必要があります。人体の細胞に問題がある場合、それが人体の健康にどのような損傷を引き起こすかがわかります。人体のさまざまな部分の好みは異なり、数も異なります。では、上皮細胞とは何でしょうか？多くの人がこの問題についてあまりよくわかっていません。

低分子上皮細胞とは何かを知らない方も多いと思います。このような問題についても詳しくご相談いただければ、上皮細胞を培養する際に、健康を害さずにどの方法を選択するのがベストかがわかります。

上皮細胞とは何ですか?

上皮細胞培養

1) 表皮細胞培養

1. 材料の採取：手術で採取した皮膚移植片または手術後の残存皮膚（できれば角質層が薄いもの、早産で流産した赤ちゃんの皮膚であればなおさら）の小片を採取し、0.5～1平方センチメートルの小片に切ります。

2. EDTA処理：まず0.02％EDTAに室温で5分間浸します。

3. 冷消化: 0.25% トリプシンに置き換え、4°C で一晩インキュベートします。

4. 分離: 皮膚を取り除き、鉗子またはピンセットを使用して表皮と真皮を分離します。

5. 温加熱処理：表皮を取り除き、別々に処理します。ハサミで細かく切り、新しい0.25％トリプシンに入れて、37℃でさらに30〜60分間加熱処理します。

6. ピペットを使用してゆっくりと上下に吹き飛ばし、細胞懸濁液を作成します。

7. 培地：80メッシュのステンレスメッシュで濾過した後、低速で遠心分離し、上清を吸引し、イーグル溶液と20％の子牛血清を直接加えて細胞懸濁液を作成し、シャーレに接種し、CO2インキュベーターで培養します。

2) 乳房組織培養

直接培養法：（繊維質の少ない軟組織の培養に適している）

1. 少量の培養液またはハンクス液が入った容器で、鋭利な刃物を使用して組織を繰り返し細かく切ります。

2. 組織片と液を遠心管に注入し、少量の培養液を加え、しばらくピペットで吹き飛ばし、試験管立てに3～5分間置きます。上清液を吸引することで、乳腺細胞以外の部分を除去できます。 2～3回繰り返します。

3. 最後の処理後、沈降管にさらに培養液を加え、ピペットで軽く吹き飛ばして沈降物を再懸濁します。細胞塊が落ちるのを待たずに、3～4 層の滅菌ガーゼを通して別のチューブに濾過します。

4. 適切な濃度に調整し、培養瓶に接種して栽培します。

コラーゲナーゼ消化法: (繊維質の多い硬い組織の処理に適しています)

プロセスは他の組織を培養する場合と同じです。

3) 胃上皮細胞培養

1. サンプル採取：胃潰瘍または胃がんの手術中に切除した胃検体の遠位端の非病変領域から少量の粘膜を採取します。

2. 洗浄：ゲンタマイシン（400μg/ml）とアムホテリシン（ハンクス液に2μg/ml）を含む溶液ですすいだ後、鈍器で下粘膜を剥がし、1mm3の大きさに切断します。

3. 消化：I型コラーゲナーゼとヒアルロニダーゼで37℃で80分間消化します。

4. 遠心分離：細胞懸濁液を収集し、800 rpmで遠心分離し、ハンクス溶液で2回洗浄します。

5. 接種: 最後の遠心分離後、1% ～ 2% のウシ胎児血清を含む完全培養培地を加え、異なる数のウェルを持つ培養プレートに接種します。接種量は実験の目的によって異なります。

4) 肝細胞培養

一次組織ブロック培養：新鮮な肝臓を採取し、まず膜や血管などの繊維成分を取り除き、ナイフやハサミを使って肝臓を1mm3程度の小片に切り、壁付着培養法を使います。

5) 内皮細胞培養

1. 出産後に新鮮なへその緒を採取します。すぐに培養しない場合は、4°C で保存できますが、12 時間を超えて保存しないでください。無菌状態で10〜15cmの長さに切ります。胎児や若い動物の大きな血管なども培養に使用できます。

2. まず、三方注射器を使用して温かい PBS 溶液を吸い取り、臍帯静脈に注入して残留血液を洗い流します。液体の逆流を防ぐために、注入口を紐で縛る必要があります。

3. 臍帯の片方の端を血管クランプで挟み、もう一方の端から臍静脈に最終濃度 0.1% のコラーゲナーゼをゆっくりと注入します。端に液体が出たら、結紮して血管を満たします。液体の逆流を防ぐために、注入口も結紮する必要があります。3 ～ 10 分間消化します。

4. 内皮細胞を含む消化液を吸引し、遠心管に注入します。より多くの細胞を得るには、温かい PBS を注入して 2 ～ 3 回すすぎ、残りの細胞を完全に除去し、遠心管に注入して遠心分離します。

5. 上清を吸引し、1640 培養培地を加えて細胞懸濁液を作り、フラスコに接種して培養します。すべてが順調に進めば、細胞は 2 ～ 3 日以内に単層に成長します。

上記の紹介を通じて、上皮細胞とは何か、上皮細胞を培養する方法は何かという紹介がありました。これらはすべて詳細に説明されています。ただし、培養するときは強制することはできません。自分のニーズに応じて選択する必要があります。これは人体のあらゆる側面に大いに役立ちます。